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        支原體核酸檢測方法比較

        發(fā)布時(shí)間:2023-12-08瀏覽量: 來源:


        肺炎支原體(Mycoplasma Pneumoniae,MP)是呼吸道感染的最常見病原體之一。近些年來 MP 感染呈現(xiàn)了許多不同以往的特點(diǎn),如:藥物效果差,感染年齡低齡化,嬰幼兒感染增多。既往認(rèn)為大環(huán)內(nèi)醋類抗生素對大多數(shù) MP 感染有效,但近年耐藥菌株增多,藥物效果變差。因此,早期、準(zhǔn)確的檢測MP 對支原體肺炎的診斷和治療具有重要的臨床意義。

        MP 感染臨床表現(xiàn)缺乏特異性,易與病毒感染相混淆。臨床常用的 MP 檢測方法有血清學(xué)檢測方法、DNA 熒光定量擴(kuò)增和近年出現(xiàn)的熒光恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(Simultaneous Amplification and Test,SAT),近幾年國內(nèi)外的指南都將核酸檢測列入了診斷 MP 感染的病原學(xué)依據(jù)中。

        開封市兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科積極學(xué)習(xí)新技術(shù),及時(shí)開展了支原體核酸檢測,那這幾種方法有什么聯(lián)系和區(qū)別呢?

        通過參考文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)對于不同年齡的兒童和不同病程的兒童推薦支原體檢測的方法:

        年齡因素:


         1歲以下組應(yīng)用支原體DNA核酸檢測陽性檢出率高,推測原因可能為嬰兒自身免疫系統(tǒng)尚不完善,針對病原的感染不能激發(fā)機(jī)體的特異性免疫應(yīng)答反應(yīng),在MP 感染情況下也可不產(chǎn)生MP-IgM 抗體或者感染 MP 后因MP-IgM 抗體效價(jià)較低不易被檢出,而分子生物學(xué)方法檢測則受年齡的影響小。故1 歲以下年齡段患兒應(yīng)首選鼻咽部分泌物PCR 法檢測 MP-DNA,不僅取樣方便,無創(chuàng)傷,且檢出率較高。

        病程:


        MP-DNA 檢出率在病程 10 天以內(nèi)隨著時(shí)間的增加陽性檢出率上升,此后隨著病程的延長,MP-DNA 的陽性檢出率逐漸下降。因MP-DNA 采用熒光定量PCR方法,具有高靈敏度和高特異性的特點(diǎn),對于患病初期的患兒應(yīng)用MP-DNA 檢測更易明確病因。

        MP-SAT陽性率隨入院治療時(shí)間的延長顯著降低,治療 3周時(shí)點(diǎn)其陽性率明顯下降,在入院后 < 24 h 和 1 周內(nèi)的陽性率明顯高于傳統(tǒng)的血清 MP-Ab抗體檢測。

        有研究對MP的 RNA和DNA的檢測在兒童支原體感染診斷中的應(yīng)用效果進(jìn)行了評價(jià)比較,結(jié)果MP-SAT檢測診斷兒童MP感染的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確性高于MP-DNA法檢測。顯示在兒童支原體感染的早期診斷中,RNA實(shí)時(shí)檢測相對而言檢測的靈敏度和準(zhǔn)確性更高,應(yīng)用價(jià)值良好[1]。

        聯(lián)合檢測MP-DNA+MP-RNA可以推斷病程,判斷預(yù)后。

        標(biāo)本MP-DNA檢測結(jié)果為陽性,而MP-RNA檢測結(jié)果為陰性的,是由于患兒處于MP肺炎的恢復(fù)期,MP死亡后RNA可以很快降解,而DNA還會(huì)存在一段時(shí)間,最長可達(dá)7個(gè)月。故聯(lián)合檢測MP-DNA+MP-RNA可以推斷病程,判斷預(yù)后。

        MP 的檢測方法中有血清學(xué)檢測、抗原檢測以及核酸檢測等方法,其中一種檢測方法不能可靠地檢測出所有感染,尤其是在兒童中。因此,為了能夠早期診斷MP 感染可選擇兩種檢測方法,如結(jié)合血清學(xué)IgM 和實(shí)時(shí) PCR(DNA 或者RNA)。

        參考文獻(xiàn):

        [ 1 ]林苗苗,施李芬,余堅(jiān),等.肺炎支原體 RNA和DNA檢測技術(shù)對兒童肺炎支原體肺炎診斷的價(jià)值 [J].中國婦幼保健 ,2018 ,33 ( 5 ) :1054-1056 .

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